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微細藻類の培養方法及びデータ解析装置

国内特許コード	P200016969
整理番号	1739-16P061
掲載日	2020年6月19日
出願番号	特願2017-038263
公開番号	特開2018-143108
出願日	平成29年3月1日(2017.3.1)
公開日	平成30年9月20日(2018.9.20)
発明者	小谷　知也松井　英明
出願人	国立大学法人鹿児島大学
発明の名称	微細藻類の培養方法及びデータ解析装置
発明の概要	【課題】最適な時期にイソクリシス属のハプト藻類を収穫することができる微細藻類の培養方法及びデータ解析装置を提供する。【解決手段】微細藻類の培養方法は、イソクリシス属（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ）のハプト藻類を培養する培養ステップと、ハプト藻類の４８０～５２０ｎｍの範囲内の第１の波長における第１の吸光度及び６６０～７００ｎｍの範囲内の第２の波長における第２の吸光度を複数の時点で測定する測定ステップと、第１の吸光度と第２の吸光度との吸光度比の複数の時点間での比較に基づいて、ハプト藻類を収穫する収穫ステップと、を含む。【選択図】図１
従来技術、競合技術の概要	イソクリシス・エスピー（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓｓｐ．）タヒチ株（以下、単に「タヒチ株」ともいう）等のイソクリシス属のハプト藻類は、海産魚介類の種苗生産で使用されている有用微細藻類である。タヒチ株は、海産魚類仔魚の餌料である海産ツボワムシ類の餌料、あるいは貝類幼生体の餌料として使用される。タヒチ株は、硝酸塩及びリン酸塩等の栄養塩、ミネラル類並びにビタミン類が混合された培養液に接種され、最大密度になるまで培養される。接種から最大密度に達する期間は、培養時の環境によって異なる。達する最大密度も培養環境によって異なるため、培養中の細胞密度のみを目安に収穫時期を決めることは難しい。タヒチ株は高度不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を細胞内に含有している。ＤＨＡは海産魚類仔魚の必須脂肪酸の一つである。上記の海産ツボワムシ類はＤＨＡが欠乏している。このため、海産ツボワムシ類を仔魚に給餌する前に、タヒチ株を栄養強化用藻類として与えることで、海産ツボワムシ類のＤＨＡを強化することができる。タヒチ株の細胞内のＤＨＡ含量は培養中に変化する。タヒチ株を栄養強化用藻類として利用する場合、ＤＨＡ含量が最大のときにタヒチ株を収穫することが望ましい。しかし、ＤＨＡ含量を測定するには時間を要するため、ＤＨＡ含量に応じてタヒチ株の収穫時期を判断することは困難である。非特許文献１では、微細藻類であるナンノクロロプシスオキュラータ（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓｏｃｕｌａｔａ）の増殖相と細胞内のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）含量との関係が解析されている。非特許文献１には、ユーグレナ（Ｅｕｇｌｅｎａｇｒａｃｉｌｉｓ）、パブロバ（Ｐａｖｌｏｖａｌｕｔｈｅｒｉ）、ドゥナリエラ（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａｔｅｒｔｉｏｌｅｃｔａ）及びポルフィリディウム（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍｓｐ．）と同様に、ナンノクロロプシスオキュラータのＥＰＡ含量が増殖期に多く、定常期に低下することが記されている。微細藻類の収穫のタイミングを決定する方法に関して、例えば、特許文献１には、培養液における赤色光の吸光度と緑色光の吸光度との比が、微細藻類の比増殖速度と相関することを利用して、微細藻類の培養状態を判断する方法が開示されている。当該方法によれば、培養状態に応じて微細藻類の収穫のタイミングを決定することができる。特許文献２には、脂溶性成分が微細藻類に十分に蓄積したタイミングで微細藻類を収穫するために、微細藻類を含む培養液から検出した２つ以上の波長域の光に関する吸光度比に基づいて、微細藻類の脂溶性成分含量の多寡を判断する方法が開示されている。
産業上の利用分野	本発明は、微細藻類の培養方法及びデータ解析装置に関する。
特許請求の範囲	【請求項１】イソクリシス属（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ）のハプト藻類を培養する培養ステップと、前記ハプト藻類の４８０～５２０ｎｍの範囲内の第１の波長における第１の吸光度及び６６０～７００ｎｍの範囲内の第２の波長における第２の吸光度を複数の時点で測定する測定ステップと、前記第１の吸光度と前記第２の吸光度との吸光度比の前記複数の時点間での比較に基づいて、前記ハプト藻類を収穫する収穫ステップと、を含む、微細藻類の培養方法。【請求項２】前記吸光度比は、前記第１の吸光度を前記第２の吸光度で除した値であって、前記収穫ステップでは、前記値が下降から上昇に転じた後、前記値が再度下降から上昇に転じてから３～５日後に前記ハプト藻類を収穫する、請求項１に記載の微細藻類の培養方法。【請求項３】前記測定ステップでは、前記ハプト藻類を含む培養液の前記第１の波長における第３の吸光度と前記第２の波長における第４の吸光度とを測定し、前記ハプト藻類が除去された前記培養液の前記第１の波長における第５の吸光度と前記第２の波長における第６の吸光度とを測定し、前記収穫ステップにおける前記第１の吸光度は、前記第３の吸光度から前記第５の吸光度を減じた値であって、前記収穫ステップにおける前記第２の吸光度は、前記第４の吸光度から前記第６の吸光度を減じた値である、請求項１又は２に記載の微細藻類の培養方法。【請求項４】前記第１の波長は、４９０ｎｍであって、前記第２の波長は、６８０ｎｍである、請求項１から３のいずれか一項に記載の微細藻類の培養方法。【請求項５】前記ハプト藻類は、イソクリシス・エスピー（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓｓｐ．）タヒチ株である、請求項１から４のいずれか一項に記載の微細藻類の培養方法。【請求項６】イソクリシス属（Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ）のハプト藻類の４８０～５２０ｎｍの範囲内の第１の波長における第１の吸光度及び６６０～７００ｎｍの範囲内の第２の波長における第２の吸光度を複数の時点で測定する測定部と、前記第１の吸光度と前記第２の吸光度との吸光度比の前記複数の時点間での比較に基づいて、ユーザーに通知を行う通知部と、を備えるデータ解析装置。
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出願権利状態	公開